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東華大學(xué)洪楓教授團(tuán)隊(duì) IJBM:可用于血液透析的細(xì)菌納米纖維素平板膜
2024-05-08  來源:高分子科技

  近日,東華大學(xué)洪楓教授團(tuán)隊(duì)采用負(fù)壓浸漬法將殼聚糖線性分子引入細(xì)菌納米纖維素(Bacterial NanoCellulose,BNC)凝膠膜,再通過離子凝膠法在BNC網(wǎng)絡(luò)基質(zhì)內(nèi)原位形成殼聚糖顆粒充填,以縮小BNC膜的纖維網(wǎng)絡(luò)孔隙,從而制備了內(nèi)嵌殼聚糖顆粒的細(xì)菌納米纖維素(Chitosan particle/bacterial nanocellulose,CSP/BNC)復(fù)合膜。文中詳細(xì)研究了該復(fù)合膜的孔徑特征、力學(xué)性能、透析性能、血液相容性和細(xì)胞相容性等,并評估了CSP/BNC膜在血液透析領(lǐng)域的應(yīng)用潛力。該成果以Chitosan particles embedded bacterial nanocellulose flat membrane for hemodialysis為題,發(fā)表于International Journal of Biological Macromolecules上(DOI: 10.1016/j.ijbiomac.2024.130646)。


  慢性腎臟疾病影響全球10%以上的人口,過去二十年中導(dǎo)致死亡率不斷攀升。血液透析是治療腎病的主要方式之一。曾經(jīng)商業(yè)化的血液透析膜是由再生纖維素構(gòu)成的,然而再生纖維素膜可能誘發(fā)患者的炎癥反應(yīng)或淀粉樣變,并且不能去除中等分子量的尿毒素;另一方面,目前常用的聚砜類合成高分子膜屬于石油基產(chǎn)品,從原料、加工和用后處理方面均不具有綠色環(huán)保等優(yōu)勢,可持續(xù)性差。因此,發(fā)展零碳的生物基血液透析膜非常必要,但是也面臨著巨大的挑戰(zhàn)。細(xì)菌納米纖維素(BNC)也稱為細(xì)菌纖維素,是一種環(huán)境可降解的天然生物聚合物,血液相容性良好,已被廣泛研究用于血液接觸材料,譬如傷口敷料、止血海綿和人工血管等。BNC天然的多孔納米纖維網(wǎng)絡(luò)非常適合去除尿毒癥毒素,然而BNC基血液透析材料卻鮮有報(bào)道,另一方面該纖維網(wǎng)絡(luò)孔隙偏大,不利于保留血液中的有益成分,如白蛋白等。殼聚糖(Chitosan,CS)是應(yīng)用最廣泛的生物基材料之一,具有生物相容性好、抗菌性能強(qiáng)和自由基清除能力高等優(yōu)點(diǎn)。該團(tuán)隊(duì)曾首次在BNC網(wǎng)絡(luò)基質(zhì)引入殼聚糖并原位形成顆粒(Chitosan particleCSP)以包封藥物等活性分子。這是一種簡單、高效和環(huán)保的方法,而且通過改變CS溶液的濃度,還可以很容易地調(diào)節(jié)CSP的粒徑和數(shù)量。然而,CSP尚未被用于調(diào)節(jié)BNC膜的孔隙特性以應(yīng)用于血液透析領(lǐng)域。因此,該團(tuán)隊(duì)為充分利用BNC的天然納米纖維網(wǎng)絡(luò),采用負(fù)壓浸漬和離子凝膠法,通過在BNC網(wǎng)絡(luò)基質(zhì)內(nèi)原位形成CSP充填來縮小BNC膜的纖維網(wǎng)絡(luò)孔隙,制備了CSP/BNC(圖1),評估了CSP/BNC膜在血液透析領(lǐng)域的應(yīng)用潛力。這是全球首個(gè)利用BNC膜實(shí)施血液透析的有益嘗試,實(shí)現(xiàn)了從01的原始創(chuàng)新。


  該研究制備工藝簡單高效,無需有毒化學(xué)交聯(lián)劑,巧妙利用線性CS分子滲入BNC網(wǎng)絡(luò),再原位形成顆粒致使體積增大,成功卡在BNC纖維網(wǎng)絡(luò)內(nèi),為BNC的網(wǎng)絡(luò)孔隙調(diào)節(jié)提供一種新的策略(圖2)。該研究結(jié)果表明,CSP的引入可有效縮小BNC的纖維網(wǎng)絡(luò)孔隙結(jié)構(gòu)(圖3)。進(jìn)一步對膜的比表面積、孔隙率、孔體積和孔徑等進(jìn)行分析(表1),發(fā)現(xiàn)復(fù)合膜的比表面積隨著CS濃度升高而降低。四種膜的孔隙度均為98%左右,這表明膜中存在大量孔隙,有利于尿毒素的滲透。與BNC膜相比,CSP/BNC膜的體密度提高了8.8-57.9%,骨架密度提高了0.9-4.5%;3% CSP/BNC膜的孔體積和孔徑分別減少了42.2%32.1%。這表明CSP的復(fù)合使天然BNC纖維網(wǎng)絡(luò)變窄,孔的數(shù)量和尺寸顯著減小(表1)。此外,CS的引入增加了BNC膜的密度,提高了膜的力學(xué)性能。相比BNC膜,3% CSP/BNC膜的楊氏模量提高了22.2倍,拉伸強(qiáng)度提高了88.9%(圖4)。CSP/BNC膜具有較高的水通量,篩分系數(shù)符合要求。3% CSP/BNC膜的水通量為290±76 L/m2/h,尿素篩分系數(shù)為0.68±0.07,溶菌酶篩分系數(shù)為0.50±0.03,牛血清白蛋白篩分系數(shù)為0.05±0.03(圖5)。3% CSP/BNC膜具有出色的血液透析性能,對中小分子量的尿毒素的清除率為已知文獻(xiàn)的2-14倍,對牛血清白蛋白的截留率與已知報(bào)道相近。3% CSP/BNC膜的尿素清除率為16.37±2.71%/cm2,溶菌酶清除率為3.54±1.69%/cm2,牛血清白蛋白截留率為98.04±0.05%/cm2(圖6)。結(jié)果顯示,CSP/BNC膜具有良好的血液相容性,溶血率低于0.3%,屬于不溶血材料(圖7),同時(shí)具有良好的細(xì)胞相容性,無細(xì)胞毒性,并且能夠支持HUVECs的粘附、增殖和鋪展(圖8)。


1. 文章設(shè)計(jì)概念圖


圖2. CSP/BNC膜的制備流程圖


3. BNCCSP/BNC膜的形態(tài)形貌:a)宏觀形貌;b)微觀形貌;c)殼聚糖顆粒的直徑統(tǒng)計(jì)分析(*p0.05


1. BNCCSP/BNC膜的比表面積、體密度、骨架密度和孔參數(shù)

附注:標(biāo)注相同字母的數(shù)值無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(#p0.05 


4. BNCCSP/BNC膜的力學(xué)性能:a)應(yīng)力-應(yīng)變曲線;b)楊氏模量;c)斷裂伸長率;d)拉伸強(qiáng)度(*p0.05 


5. BNCCSP/BNC膜的滲透性能:a)水通量;b)尿素篩分系數(shù);c)溶菌酶篩分系數(shù);d)牛血清白蛋白篩分系數(shù)(*p0.05 


6. BNCCSP/BNC膜的透析性能: a)尿素清除率;b)溶菌酶清除率;c)牛血清白蛋白截留率 


7. BNCCSP/BNC膜的血液相容性:a)全血凝固時(shí)間;b)溶血率;c)血漿復(fù)鈣曲線;d)血漿復(fù)鈣時(shí)間(*p0.05 


8. BNCCSP/BNC膜的細(xì)胞相容性:A)細(xì)胞存活率;B)細(xì)胞增殖情況;C)細(xì)胞熒光染色及FE-SEM圖(#p0.05,*p0.05


  論文第一作者為東華大學(xué)生物與醫(yī)學(xué)工程學(xué)院博士研究林露露,通訊作者為細(xì)菌納米纖維制造及復(fù)合技術(shù)科研基地的陳根強(qiáng)研究員洪楓教授。該研究得到了東華大學(xué)博士研究生創(chuàng)新基金的資助。


  全文下載鏈接:https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2024.130646

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